Згідно з даними огляду, надрукованого в Clinical Biochemist Reviews, застосування високоефективної рідинної хроматографії в поєднанні з тандемной мас-спектрометрією (ВЕРХ-МС / МС) в клінічних лабораторіях надзвичайно зросла протягом останніх 10-12 років. Автори відзначають, що специфічність аналізу ВЕРХ-МС / МС значно перевершує імунологічні методи і класичну високоефективну рідинну хроматографію (ВЕРХ) при аналізі молекул з низькою молекулярною вагою і має значно більш високою продуктивністю, ніж газова хроматографія-мас-спектрометрії (ГХ-МС). Популярність цього методу при рутинних клінічних аналізах в даний час пояснюється унікальними можливостями методу.

Основними перевагами методу ВЕРХ-МС / МС є:
• Можливість точного кількісного аналізу малих молекул;
• Одночасний аналіз безлічі цільових сполук;
• Унікальна специфічність;
• Висока швидкість аналізу.

В останні роки багато уваги приділяється часу аналізу і, як наслідок, підвищенню виробник-ності лабораторії. Значне скорочення часу аналізу стало можливим завдяки застосуванню коротких аналітичних колонок для ВЕРХ / МС / МС, одночасно різко збільшився специфічність аналізу. Використання методу іонізації при атмосферному тиску (API), тандемного потрійного квадрупольного мас-спектрометра і вдосконаленою високоефективної рідинної хроматографії, а також відповідних методів підготовки зразків, привели ВЕРХ-МС / МС в перші ряди сучасних аналітичних методів для клінічних досліджень.

Основні області застосування ВЕРХ / МС / МС в клінічній медицині:
• Отримання повного профілю метаболізму стероїдів (steroids panels), пуринів і піримідинів та інших з'єднань,
  скринінг новонароджених на вроджені помилки метаболізму (виявлення декількох десятків захворювань за один аналіз);
• Терапевтичний моніторинг лікарських препаратів - імунодепресантів, перотівосудорожних, антиретровірусних, антикоагулянтів, і будь-яких інших - незалежно від наявності наборів виробника. Не потрібно купувати дорогі набори для кожної речовини - можна розробляти власні методики;
• Клінічна токсикологія - аналіз понад 500 наркотичних сполук та їх метаболітів за один аналіз, без підтверджуючого аналізу
  протеоміка і метаболоміка.

Крім того, ВЕРХ-МСМС використовується для скринінгу олігосахарідове в сечі, сульфатідов, дліноцепочечних жирних кислот, дліноцепочечних жовчних кислот, Метилмалоновой кислоти, дослідження Порфирій, скринінгу пацієнтів з порушеннями пуринового і піримідинового метаболізму.

Приклади застосування рідинної хроматографії
в поєднанні з тандемной мас-спектрометрією в клінічних аналізах.

Скринінг новонароджених:Першим прикладом масового застосування ВЕРХ-МС / МС в клінічної діагностикибув скринінг вроджених помилок метаболізму у новонароджених. В даний час в розвинених країнах це є рутинним методом і охоплює більше 30 різних захворювань, включаючи ацедеміі, аміноацідопатіі, дефекти окислення жирних кислот. Слід особливо відзначити дослідження вроджених дефектів, які можуть призвести до серйозних проблем, Якщо не вжити негайних заходів (наприклад, збільшені серце або печінку або набряк мозку). Перевагою використання ВЕРХ-МС / МС для скринінгу новонароджених є можливість одночасно аналізу всіх амінокислот і ацилкарнітину швидким, недорогим і високоспецифічний методом.

Терапевтичний моніторинг лікарських препаратів:Розробка і впровадження імунодепресанта сиролімусу (рапаміцин) для запобігання відторгнення органів після трансплантації була одним з основних стимулів впровадження ВЕРХ-МС / МС в клінічні лабораторії. Сучасний метод ВЕРХ-МС / МС дає можливість одночасного визначення такролімусу, сиролімусу, циклоспорину, еверолімусу і мікофенойной кислоти.

ВЕРХ-МС / МС застосовується також для аналізу цитотоксичних, антиретровірусних лікарських речовин, Трициклічнихантидепресантів, антиконвульсантів і інших препаратів, що вимагають індивідуальної дозування.

Метод ВЕРХ-МСМС дозволяє розділити і кількісно визначити R- і S- енантіомери варфарину в діапазоні концентрацій 0.1-500 нг / мл.

Наркотичні і болезаспокійливі речовини:ВЕРХ-МС / МС широко застосовується для аналізу цих сполук завдяки простоті пробоподготовки і малому часу аналізу. В даний час метод використовується в клінічних лабораторіях для скринінгу на присутність широкого спектра наркотичних речовин. Унікальна специфічність і чутливість методу дає можливість одночасного аналізу більше 500 з'єднань різних класів в одній пробі з мінімальною пробопідготовкою. Так, у разі аналізу сечі, досить простого розведення проби в 50-100 разів. При аналізі волосся замість пучка в 100-200 волосся для достовірного виявлення фактів вживання наркотичних засобів досить одиничного волоса.

Ендокринологія та аналіз стероїдів:ВЕРХ-МС / МС широко застосовується в багатьох ендокринологічних лабораторіях для аналізу стероїдів - тестостерону, кортизолу, альдестерона, прогестерону, естріолу та багатьох інших.

Все більше лабораторій починають використовувати ВЕРХ-МС / МС для визначення рівня в крові вітаміну Д3 і Д2.

I. Визначення стероїдів (steroid profile).

Лабораторії при лікарнях і клініках в даний час мають можливість проводити за допомогою ВЕРХ / МС / МС одночасне визначення декількох стероїдів. При цьому немає необхідності у великому обсязі зразка, що особливо важливо при аналізах дитячих зразків.

Випадки, при яких доцільно проводити визначення кількох (профілювання) стероїдів:
• Вроджена гіперплазія надниркових залоз (Congenital adrenal hyperplasia, CAH) є вродженим дефектом біосинтезу стероїдів. Це спадкова група захворювань, викликана неправильною активністю ензимів кори надниркових залоз, що веде до зниження вироблення кортизолу. Для достовірної діагностики САН рекомендується визначати кортизол, андростендіон і 17-оксипрогестерон. ВЕРХ / МС / МС дозволяє проводити точне кількісне визначення всіх трьох стероїдів за один аналіз зі 100% вірогідністю.
• Рутинний скринінг новонароджених з використанням імуноаналізу відрізняється високим рівнем лоноположітельних і помилково негативні результати. Визначення за допомогою ВЕРХ / МС / МС не тільки кортизолу, а й альдостерону і 11-деоксикортизолу дозволяє відрізнити первинну недостатність кори надниркових залоз від вторинної.
• ВЕРХ / МС / МС дозволяє проводити визначення стероїдів при простатиті та синдромі хронічної тазової болі.
• ВЕРХ-МС / МС дозволяє визначити профіль стероїдів і ідентифікувати причини передчасного статевого дозрівання, пов'язаного з корою наднирників, у маленьких дітей. Було знайдено, що концентрації тестостерону, андростендіону, дегідроепіандростерона (DHEA) і його сульфату у цих дітей були трохи вище, ніж у старших дітей контрольної групи.
• Сироватка крові активних курців, пасивних курців і некурящих, аналізується на присутність 15 стероїдних гормонів і тиреоїдних гормонів для дослідження зв'язку між пацієнтами, схильними до дії диму, і концентраціями гормонів.
• ВЕРХ / МС / МС використовується при профілювання деяких жіночих стероїдних гормонів в сечі.
• За допомогою ВЕРХ / МС / МС була проведена оцінка концентрацій нейроактивних гормонів з метою запобігання діабетичної нейропатії.

II. Визначення тиреоїдних гормонів

Рутинні методи визначення тиреоїдних гормонів зазвичай засновані на радіоіммуноаналізе, який є дорогим і дозволяє визначати тільки Т3 і Т4, що може обмежувати можливості визначення і повного регулювання функцій щитовидної залози.

• В даний час при використанні ВЕРХ-МСМС проводиться одночасний аналіз в зразках сироватки крові п'яти тиреоїдних гормонів, включаючи тироксин (Т4), 3,3 ', 5-трііодотіронін (Т3), 3,3', 5'- (rT3), 3 , 3'дііодотіронін (3,3 '-T2) і 3,5-дііодотіронін (3,5-T2) в діапазоні концентрацій 1 -500 нг / мл.
• Метод ВЕРХ / МС / МС застосовується також для аналізу складу гормонів пацієнтів, які пройшли тиреоїдектомію. Визначаються рівні концентрацій тироксину (Т4), трііодотіроніна (Т3), вільного Т4 і тиреоїд стимулюючого гормону (ТSH) після операції. Встановлено, що ВЕРХ / МС / МС є прекрасним способом встановлення взаємозв'язку між ТSH і концентраціями тиреоїдних гормонів.
• Метод ВЕРХ / МС / МС був застосований для визначення тироксину (Т4) в слині і сироватці крові людини. Метод відрізняється високою відтворюваністю, точністю і межею виявлення 25 пкг / мл. Проведені дослідження показали, що існує діагностична залежність в концентраціях Т4 в слині між еутиреоїдного випробуваними і пацієнтами з хворобою Грейвса.

Метод ВЕРХ / МС / МС в даний час володіє чутливістю, специфічністю і точністю, необхідними для надійного визначення всіх стероїдів в біологічних рідинах і таким чином підвищує діагностичні можливості, особливо в разі визначення наборів стероїдів.

III. Визначення 25-оксівітаміна Д методом ВЕРХ / МС / МС

25-окси вітамін Д (25ОД) є основною циркулюючої формою вітаміну Д і попередником його активної форми. (1,25-діоксівітамін Д). Зважаючи на тривалий період його напіввиведення визначення 25ОД важливо для визначення статусу вітаміну Д в організмі пацієнта. Вітамін Д існує в двох формах: вітамін Д3 (холекальциферол) і вітамін Д2 (ергокальциферол). Обидві форми метаболизируют в соответствуюших 25ОД форми. Дуже велике значення для діагностики має наявність аналітичних методів, які можуть визначати з високою точністю обидві форми вітаміну і дозволяють проводити моніторинг пацієнтів з порушеннями вмісту вітаміну Д. Застосовувані до сих пір методи не дозволяли проводити роздільне визначення вітаміну Д2 і Д3. Крім того, при високих концентраціях вітаміну Д2 знижується визначається кількість Д3. Іншим недоліком є ​​застосування радіоактивних ізотопів. Застосування методу ВЕРХ / МС / МС дозволило не тільки уникнути застосування радіоактивних ізотопів, а й проводити роздільне визначення обох активних форм вітаміну.

Метод застосуємо для наступних пацієнтів:
1. При підозрі на знижений вміст вітаміну Д в організмі;
2. При підозрі на незрозуміле токсичний вплив;
3. При обстеженні пацієнтів, що проходили курс лікування з приводу пониженого вмісту вітаміну Д;
4. Використання ВЕРХ / МС / МС дозволило проводити роздільне визначення обох форм при моніторингу пацієнтів.

IV. Визначення імунодепресантів методом ВЕРХ / МС / МС

Після трансплантації органів необхідно приймати імунодепресанти протягом усього життя, щоб уникнути реакції відторгнення. Володіючи дуже вузький терапевтичний діапазон і високу токсичність, імунодепресанти вимагають індивідуальної дозування для досягнення максимального ефекту. Тому життєво важливим є моніторинг основних імунодепресантів: циклоспорину А, такролімусу, сиролімусу і еверолімусу для регулювання дози ліків для кожного індивідуального пацієнта в залежності від концентрації препарату в крові.

Іммуноаналіз все ще використовується для моніторингу перерахованих лікарських препаратів, проте ці методи дорогі і їх специфічність, точність і відтворюваність обмежені. Відомі випадки загибелі пацієнтів від неправильного дозування імунодепресантів, заснованих на результатах, отриманих за допомогою імунологічних методів. В даний час імуноаналізу замінюються в клінічних лабораторіях на ВЕРХ / МС / МС. Так, в клініці університету Мюнхена щодня проводиться аналіз близько 70 зразків на вміст сиролімусу і циклоспорину А з використанням ВЕРХ / МС / МС системи. Вся підготовка зразків і керування приладом здійснюється одним співробітником. Лабораторія перемикається також на аналіз такролімусу цим методом.

• Описано застосування ВЕРХ / МС / МС для рутинного одночасного визначення такролімусу, сиролімусу, аскоміціна, деметіксісіролімуса, циклоспорину А і циклоспорину G в крові. Діапазон можна визначити концентрацію 1.0 - 80.0 нг / мл. Для циклоспорину 25 - 2000 нг / мл. Протягом року в лабораторії було проаналізовано понад 50,000 зразків.
• Оскільки було встановлено, що одночасне застосування такролімусу і сиролімусу дає позитивний терапевтичний ефект, був розроблений простий і ефективний ВЕРХ / МС / МС метод роздільного їх визначення в крові для клінічних аналізів. Аналіз одного зразка займає 2.5 хвилини з точністю від 2.46% - 7.04% для такролімусу і 5.22% - 8.30% для сиролімусу для всієї аналітичної кривої. Нижня межа визначення такролімусу 0.52 нг / мл, сиролімусу - 0.47 нг / мл.

V. Визначення гомоцистеїну методом ВЕРХ / МС / МС

Гомоцистеїн представляє інтерес при серцево-судинних захворюваннях (тромбоемболії, хворобах серця, атеросклерозі) та інших клінічних станів(Депресії, хвороби Альцхаймера, остеопорозі, ускладненнях при вагітності та ін.). Існуючі методи аналізу гомоцистеїну, включаючи імунноаналіз, є дорогими. Розроблено швидкий ВЕРХ / МС / МС метод аналізу гомоцистеїну для рутинного клінічного застосування при аналізі великої кількості зразків. Іонізація проводилася методом електрораспиленія. Метод є відтвореним, високоспецифічний і точним. Перевагами методу є також низька вартість реагентів і простота пробоподготовки. В добу можливо проводити аналіз 500 і більше зразків.

висновок

Слід зазначити, що навіть при тому, що в даний час використовуються значно вдосконалені методи імуноаналізу, в силу технічних принципових обмежень, даний метод ніколи не буде мати порівнянної з ВЕРХ-МСМС точністю і специфічністю до цільового речовини, особливо в присутності метаболітів. Це не тільки призводить до низької точності методу ІФА і високому відсотку хибно-позитивних та хибно-негативних результатів, але і не дозволяє порівнювати результати, отримані в різних клінічних відділеннях при використанні методу ІФА. Застосування ВЕРХ-МС / МС усуває цей недолік, дозволяє проводити високоспецифічний, точний і швидкий аналіз великої кількості зразків з високою вірогідністю в присутності метаболітів і відсутності перешкод від супутніх і ендогенних речовин, що знаходяться в плазмі і крові пацієнтів.

Незважаючи на гадану дорожнечу приладового комплексу, як показує світова практика, при правильній експлуатації, даний комплекс окупається за 1-2 роки. Це відбувається, перш за все, завдяки низькій собівартості одного аналізу за рахунок одночасного аналізу десятків і сотень сполук і відсутності необхідності придбання дорогих діагностичних наборів. Крім цього, у лабораторії з'являється можливість самостійно розробляти будь-які необхідні методики аналізу і не залежати від виробника наборів.

Вибір правильної конфігурації приладового комплексу

Існує велика кількість різних методів мас-спектрометрії і типів мас-спектрометрів, призначених для вирішення найрізноманітніших завдань - від структурної ідентифікації складних білкових макромолекул масою в сотні тисяч Дальтон до рутинного високопродуктивного кількісного аналізу малих молекул.

Для успішного вирішення поставленого завдання одним з основних умов є вибір правильного типу обладнання. Не існує універсального приладу, що дозволяє вирішувати весь спектр аналітичних задач. Так, прилад, призначений для розв'язання задачі ідентифікації мікроорганізмів, не здатний проводити кількісний аналіз малих молекул. І навпаки. Справа в тому, що, незважаючи на загальну назву, це абсолютно різні прилади, що працюють на різних фізичних принципах. У першому випадку це часопролітної мас-спектрометр з лазерним джерелом іонізації - MALDI-TOF, а в другому - потрійний квадруполь з іонізацією електроспреем - ВЕРХ-МСМС.

Другим за значимістю параметром є вибір правильної конфігурації системи. Існує кілька основних виробників мас-спектрометричного устаткування. У приладів кожного виробника є не тільки свої сильні, але і слабкі сторони, про які вони зазвичай воліють замовчувати. Кожен виробник випускає свою лінійку приладів. Вартість одного аналітичного комплексу знаходиться в інтервалі вартістю від 100,000 до 1,000,000 і більше доларів. Вибір оптимального виробника і правильної конфігурації обладнання дозволить не тільки заощадити значні фінансові ресурси, а й більш ефективно вирішувати поставлену задачу. На жаль, існує багато прикладів, коли оснащення лабораторії проводилося без урахування цих чинників. Результат - обладнання, що простоює, марно витрачені гроші.

Третім фактором, що визначає успішну роботу лабораторії, є персонал. Для роботи на мас-спектрометрах потрібно висококваліфікований персонал. На жаль, ні в одному вузі Росії немає курсу сучасної практичної мас-спектрометрії, особливо стосовно до клінічних додатків, і завдання навчання персоналу кожної лабораторії доводиться вирішувати своїми силами. Природно, 2-3 днів ознайомчого тренінгу, проведеного виробником після запуску обладнання, абсолютно недостатньо для розуміння основ методу і придбання навичок роботи на приладі.

Четвертим фактором є відсутність готових методик аналізу. У кожній лабораторії є свої пріоритетні завдання, для вирішення яких необхідно розробляти свої методики. Робити це може людина, що володіє досвідом роботи на приладі не менше 2-3 років. Фірми-виробники іноді постачають одну-дві загальні методики рекомендаційного характеру, але не адаптують їх під конкретні завдання лабораторії.

В ТОВ «БіоФармЕкcперт»працюють фахівці з багаторічним стажем роботи на різних типах мас-спектрометрів, а також розробці методик і постановці високопродуктивних аналізів. Тому ми надаємо наступні послуги:

1. Вибір оптимальної конфігурації приладу під конкретні завдання клієнта.
2. Закупівля, постачання і запуск обладнання провідних виробників тандемних мас-спектрометров.Поетапное навчання персоналу протягом року з моменту запуску обладнання.
3. Набір готових методик і баз даних для вирішення основних клінічних завдань.
4. Розробка методик аналізу і вирішення конкретних завдань клієнта в його лабораторії із залученням його персоналу.
5. Методична підтримка на всіх стадіях роботи.

опис

підготовка

показання

інтерпретація результатів

Документи до заповнення

опис

метод визначення

Тандемна мас-спектрометрії з іонізацією в електроспрей.

досліджуваний матеріал Капілярна кров, зібрана на спеціальну картку-фільтр №903

Доступний виїзд на будинок

Аналіз спектру амінокислот і ацилкарнітину методом тандемной мас-спектрометрії (ТМС)

Що таке порушення метаболізму? Спадкові порушення метаболізму або по-іншому обміну речовин - це близько 500 різних захворювань, які обумовлені порушенням роботи особливих біохімічних каталізаторів - ферментів. Ферменти забезпечують процеси розщеплення амінокислот, органічних кислот, жирних кислот та інших біомолекул. Багато хто помилково вважає, що оскільки захворювання цієї групи зустрічаються вкрай рідко, то і виключати їх потрібно в останню чергу. Однак за даними літератури *, спадковими порушеннями метаболізму страждає один з 3000 новонароджених!

Особливе місце серед цих захворювань займають хвороби, які починаються в ранньому дитячому віці. Ці захворювання часто поєднуються з важкої неонатальної патологією та / або протікають під маскою таких станів як сепсис, перинатальне ураження нервової системи, Внутрішньоутробна інфекція. Пізнє виявлення захворювань цієї групи може привести до важкої інвалідності або навіть летального результату. Встановлено, що 5% ** всіх випадків «синдрому раптової смерті немовлят» - наслідок спадкових порушеньметаболізму. Однак деякі з цих захворювань ефективно лікуються при своєчасній діагностиці. Одним із сучасних методівдіагностики порушень метаболізму є тандемна мас-спектрометрії (ТМС). Цей метод дозволяє визначити в невеликій кількості біологічного матеріалу (крапля висушеної крові), що дозволяє з певною вірогідністю запідозрити спадкове захворювання. У деяких країнах цим методом проводиться обстеження всіх новонароджених на 10-30 спадкових порушень метаболізму. Іншими словами, все новонароджені піддаються спеціальному біохімічному дослідженню званому скринінг. * Vilarinho L, Rocha H, Sousa C, Marcão A, Fonseca H, Bogas M, Osório RV. Four years of expanded newborn screening in Portugal with tandem mass spectrometry. J Inherit Metab Dis. 2010 Feb 23 ** Olpin SE The metabolic investigation of sudden infant death. Ann Clin Biochem, 2004, Jul 41 (Pt4), 282-293 ** Opdal SH, Rognum TO The sudden Infant Death Syndrome Gene: Does It Exist? Pediatrics, 2004, V.114, N.4, pp. e506-e512 Що таке скринінг? Скринінг (від англ. Screening - просіювання) - це масове обстеження пацієнтів для виявлення різних захворювань, рання діагностика яких дозволяє запобігти розвитку важких ускладнень та інвалідності. На які захворювання проводиться обов'язкове скринінгове обстеження новонароджених в нашій країні? У Росії існує державна програма, яка включає в себе обов'язкове обстеження (скринінг) всіх новонароджених лише на 5 спадкових захворювань: фенілкетонурії (ФКУ), муковісцидозу, галактоземії, адреногенитального синдрому і вродженого гіпотиреозу.

Звертаємо Вашу увагу на те, що з цього переліку до складу дослідження «п'ятки» входить тільки скринінг на фенілкетонурію (повний перелік виявлених спадкових хвороб обміну речовин за допомогою скрініга «п'ятки» див. Нижче по тексту).

На які захворювання можна обстежити дитину додатково? Скринінгу новонароджених, спрямованого на діагностику порушень метаболізму методом ТМС, в Росії на даний момент не проводиться. У Росії це дослідження поки проводиться за призначенням лікаря при наявності підозр на спадкові хвороби обміну речовин, хоча багато хто з захворювань цієї групи проявляють себе не відразу після народження, але при цьому вже є у новонародженого. Однак, вже згаданим раніше методом тандемной мас-спектрометрії (ТМС) можна додатково обстежити новонародженого дитини на виключення 37 різних спадкових захворювань, які відносяться до порушень обміну амінокислот, органічних кислот і дефектів ß -Окислення жирних кислот. Аміноацідопатіі Аміноацідопатіі розвиваються внаслідок нестачі специфічних ферментів, необхідних для метаболізму амінокислот. Це призводить до аномально високому рівню амінокислот і їх похідних в крові і сечі, які надають токсичну дію на клітини і тканини організму. Основні симптоми: затримка розвитку, судоми, коматозні стани, блювота, діарея, незвичайний запах сечі, порушення зору і слуху. Лікування полягає в призначенні спеціальної дієти і вітамінів. Ефективність терапії залежить від того, наскільки рано і точно встановлений діагноз. На жаль, деякі захворювання з цієї групи не піддаються лікуванню. Органічні ацидурія / ацидемії Органічні ацидурія / ацидемії є результатом порушення хімічного розщеплення амінокислот внаслідок недостатньої активності ферментів. Їх клінічні прояви схожі з проявами аміноацідопатій. Лікування полягає в призначенні спеціальної дієти і / або вітамінів. На жаль, деякі захворювання з цієї групи не піддаються лікуванню. Дефекти ß-окислення жирних кислот ß-окислення жирних кислот - багатоступінчастий процес їх розщеплення, в результаті якого утворюється енергія, необхідна для життєдіяльності клітини. Кожен крок процесу окислення виробляється під дією специфічних ферментів. При відсутності одного з ферментів процес порушується. Симптоми: сонливість, кома, блювота, низький рівень цукру в крові, ураження печінки, серця, м'язів. Лікування полягає в призначенні низкожировой дієти з частим і дробовим годуванням, інших спеціалізованих дієтичних продуктів, а також, левокарнітіна. Повний перелік виявлених спадкових хвороб обміну речовин

1. Хвороба з запахом кленового сиропу сечі (лейциноз).
2. Цітрулінемія тип 1, неонатальна цітрулінемія.
3. Аргініносукціновая ацидурия (АСА) / недостатність аргініносукцінат ліази ліази.
4. Недостатність орнітин транскарбамілази.
5. Недостатність карбамілфосфат синтази.
6. Недостатність N-ацетілглютамат синтази.
7. Некетотіческая гіпергліцінемію.
8. Тирозинемия тип 1.
9. Тирозинемия тип 2.
10. Гомоцистинурія / недостатність цистатіонін бета-синтетази.
11. Фенілкетонурія.
12. Аргінінемія / недостатність аргінази.
13. Пропіонова ацидемія (недостатність пропіоніл КоА карбоксилази).
14. Метилмалонова ацидемія.
15. Изовалериановая ацидемія (недостатність ізовалеріл КоА дегідрогенази).
16. Недостатність 2-метілбутіріл КоА дегідрогенази.
17. Недостатність ізобутіріл КоА дегідрогенази.
18. Глутарова ацидемія тип 1 (недостатність глутарил КоА дегідрогенази тип 1).
19. Недостатність 3-метілкротоніл КоА карбоксилази.
20. Множинна карбоксілазная недостатність.
21. Недостатність біотинідази.
22. Малонова ацидемія (недостатність Малоні КоА декарбоксилази).
23. Недостатність мітохондріальної ацетоацетил КоА тіолази.
24. Недостатність 2-метил-3-гідроксібутіріл КоА дегідрогенази.
25. Недостатність 3-гідрокси-3-метилглутарил КоА ліази.
26. Недостатність 3-метілглутаконіл КоА гідратази.
27. Недостатність середньоланцюговими ацил-КоА дегідрогенази.
28. Недостатність дуже довголанцюгової ацил-КоА дегідрогенази.
29. Недостатність коротко ацил-КоА дегідрогенази.
30. Недостатність довголанцюгової 3-гідроксіаціл-КоА дегідрогенази (дефект тріфункціонального білка).
31. Глутарова ацидемія тип II (недостатність глутарил КоА дегідрогенази тип II), множинна недостатність ацил-КоА дегідрогеназ.
32. Порушення транспорту карнітину.
33. Недостатність карнітин палмітоіл трансферази тип I.
34. Недостатність карнітин палмітоіл трансферази тип II.
35. Недостатність карнітин / ацилкарнітину транслокази.
36. Недостатність 2,4-діеноіл КоА редуктази.
37. Недостатність середньоланцюговими 3-кетоацил-КоА тіолази.
38. Недостатність середньо- / коротко ацил-КоА дегідрогенази.

Матеріал для дослідження: капілярна кров, зібрана на спеціальну картку-фільтр №903.

література

1. Chace D.H., Kalas T.A., Naylor E.W. The application of tandem mass spectrometry to neonatal screening for inherited disorders of intermediary metabolism. Annu Rev Genomics Hum Genet. 2002; vol. 3; p. 17-45.
2. Leonard J.V., Dezateux C. Screening for inherited metabolic disease in newborn infants using tandem mass spectrometry. BMJ. 2002; vol. 324 (7328); p. 4-5.
3. Millington D., Kodo N., Terada N., Roe D., Chace D. The analysis of diagnostic markers of genetic disorders in human blood and urine using tandem mass spectrometry with liquid secondary ion mass spectrometry.1991 Int.J.Mass Spectr .Ion Process. 111: 211-28.
4. Chace D.H. Mass spectrometry in the clinical laboratory. Chem Rev. 2001 Feb; 101 (2): 445-77.
5. Duran M., Ketting D., Dorland L., Wadman S.K. The identification of acylcarnitines by desorption chemical ionization mass spectrometry. J Inherit Metab Dis. 1985; 8 Suppl 2: 143-4.
6. Millington D.S., Kodo N., Norwood D.L., Roe C.R. Tandem mass spectrometry: a new method for acylcarnitine profiling with potential for neonatal screening for inborn errors of metabolism. J Inherit Metab Dis. 1990; 13 (3): 321-4.
7. Chace D.H., DiPerna J.C., Mitchell B.L., Sgroi B., Hofman L.F., Naylor E.W .. Electrospray tandem mass spectrometry for analysis of acylcarnitines in dried postmortem blood specimens collected at autopsy from infants with unexplained cause of death. Clin Chem. 2001; 47 (7): 1166-82.
8. Rashed M.S., Bucknall M.P., Little D., Awad A., Jacob M., Alamoudi M., Alwattar M., Ozand P.T. Screening blood spots for inborn errors of metabolism by electrospray tandem mass spectrometry with a microplate batch process and a computer algorithm for automated flagging of abnormal profiles. Clin Chem. 1997 Jul; 43 (7): 1129-41.
9. Millington D.S., Terada N., Chace D.H., Chen Y.T., Ding J.H., Kodo N., Roe C.R. The role of tandem mass spectrometry in the diagnosis of fatty acid oxidation disorders. Prog Clin Biol Res. 1992; 375: 339-54.
10. Rashed M.S., Ozan P.T., Harrison M.E., Watkins P.J.F., Evans S. 1994. Electrospray tandem mass spectrometry in the analysis of organic acidemias. Rapid Commun. Mass Spectrom. 8: 122-33
11. Vreken P., van Lint A.E., Bootsma A.H., Overmars H., Wanders R.J., van Gennip A.H. Rapid diagnosis of organic acidemias and fatty-acid oxidation defects by quantitative electrospray tandem-MS acyl-carnitine analysis in plasma. Adv Exp Med Biol. 1999; 466: 327-37.
12. Griffiths W.J., Jonsson A..P, Liu S., Rai D.K., Wang Y. Electrospray and tandem mass spectrometry in biochemistry. Biochem J. 2001 May 1; 355 (Pt 3): 545-61.
13. Dooley K.C. Tandem mass spectrometry in the clinical chemistry laboratory. Clin Biochem. 2003 Sep; 36 (6): 471-81.
14. Михайлова С.В., Ільїна Е.С., Захарова Є.Ю., Байдакова Г.В., Бембеева Р.Ц., Шехтер О.В., Захаров С.Ф. «Множинна карбоксілазная недостатність, зумовлена ​​мутаціями в гені біотинідази // Медична генетика. - 2005. - №2. - C. 633-638.
15. Байдакова Г.В., Букіна О.М., Гончаров В.М., Шехтер О.В., Букіна Т.М., Покровська А.Я., Захарова Є.Ю., Михайлова С.В., Федонюк І .Д., Колпакчи Л.М., Семикіна Л.І., Ільїна Е.С. Діагностика спадкових хвороб обміну речовин на основі поєднання методів тандемной мас-спектрометрії та ензимодіагностики, Медична генетика, 2005, т. 4, №1, с. 28-33.
16. Захарова Є.Ю., Ільїна Е.С., Букіна О.М., Букіна Т.М., Захаров С.Ф., Михайлова С.Ф., Федонюк І.Д., Байдакова Г.В., Семикіна Л .І., Колпакчи Л.М., Зайцева М.Н. «Результати проведення селективного скринінгу на спадкові хвороби обміну речовин серед пацієнтів психоневрологічних відділень». Другий Всеросійський Конгрес, « Сучасні технологіїв педіатрії та дитячої хірургії », Матеріали Конгресу, стор. 141-142.
17. Baidakova G.V., Boukina A.M., Boukina T.M., Shechter O.V., Michaylova S.V. I'lina E.S, Zakharova E.Yu Combination of tandem mass spectrometry and lysosomal enzymes analysis - effective tool for selective screening for IEM in neurological clinic. SSIEM 41st Annual Symposium, Amsterdam, August 31-September 3, 2004.
18. Mikhaylova S.V., Baydakova G.V., Zakharova E.Y., Il'ina E.S. First cases of biotinidase deficiency in Russia. European Journal of Human Genetics Vol.13-Supplement1-May, 2005, p. 386.
19. Байдакова Г.В., Захарова Є.Ю., Зінченко Р.А. Недостатність середньоланцюговими ацил-КоА-дегідрогенази жирних кислот. Матеріали V з'їзду російського товариствамедичних генетиків, Уфа, травень 2005, Медична Генетика, т. 4, № 4, с. 153.
20. Захарова Є.Ю., Байдакова Г.В., Шехтер О.В., Ільїна Е.С., Михайлова С.В. Тандемна мас-спектрометрії - новий підхіддіагностики спадкових порушень обміну речовин, Матеріали V з'їзду Російського товариства медичних генетиків, Уфа, травень 2005, Медична Генетика, т. 4, №4, с.188.
21. Mikhaylova S.V., Zakharova E.Y, Baidakova G.V., Shehter O.V., Ilina E.S Clinical outcome of glutaric aciduria type I in Russia. J.Inherit. Metab.Dis 2007, v. 30, p. 38 22. Baydakova GV, Tsygankova PG. Diagnosis of mitochondrial β-oxidation defects in Russia. J Inherit Metab Dis (2008) 31 (Suppl 1) p.39

підготовка

Що робити, якщо необхідно обстежити дитину на спадкові порушення метаболізму?

• За призначенням лікаря або самостійно в будь-якому медичному офісі ИНВИТРО необхідно заздалегідь придбати набір для проведення дослідження, в який входить:

Підготовка до дослідження і правила взяття крові у новонароджених

1. Взяття зразків крові у новонароджених дітей здійснюється в родопомічних закладах спеціально підготовленим співробітником, а в разі ранньої виписки новонародженого (до 4 дня життя) - спеціально підготовленої патронажної сестрою.
2. При обстеженні новонароджених взяття проби крові слід проводити не раніше 4-х діб у доношених і 7-х діб у недоношених дітей. У новонароджених кров беруть з п'ятки, у дітей старше 3 міс - з пальця.
3. У новонароджених від початку повного грудного або штучного вигодовування до взяття крові повинно пройти не менше 4-х діб. Взяття крові проводять через 3 години після годування (у новонароджених - перед черговим годуванням).
4. Перед взяттям крові у новонародженого стопу дитини необхідно ретельно вимити милом, протерти стерильним тампоном, змоченим 70% спиртом, а потім оброблене місце промокнути стерильною сухою серветкою!
5. Прокол роблять одноразовим стерильним скарифікатором на глибину 2,0 мм (зони проколу зображені на). Першу краплю крові видаляють стерильною сухим тампоном.
6. М'яким натисканням на п'яту сприяють накопиченню другий краплі крові, до якої перпендикулярно прикладають спеціальну картку з фільтрувального паперу і просочують повністю і наскрізь 5 зон, окреслених кругової лінією. Плями крові повинні бути не менше зазначеного на бланку розміру, вид плям повинен бути однаковий по обидва боки,. Ніколи не використовуйте протилежну сторону фільтрувального паперу для заповнення кіл.
7. Після взяття крові осушите зону проколу стерильним тампоном і наклейте бактерицидний пластир на ділянку проколу. Увага! Від якості взяття крові залежить точність і достовірність дослідження!
8. Спеціальну картку з фільтрувального паперу висушують не менше 2 - 4 годин при кімнатній температурі. Уникайте потрапляння прямих сонячних променів! Для цього відведіть зовнішній клапан картки і підведіть його край під протилежну поверхню фільтра (де не позначені кола),. Після повного висихання крапель крові перемістіть клапан картки над поверхнею фільтра. Підпишіть Прізвище І. О. дитини внизу картки (Name) і вкажіть дату взяття крові (Date),. Картку помістіть в маленький конверт і вкладіть його в попередньо підписаний великий конверт. Заповніть направітельний бланк замовлення і також вкладіть його у великий конверт.
9. Передайте великий конверт в найближчий медичний офіс ІНВІТРО (конверт Не запечатуй). Співробітник ИНВИТРО у вашій присутності перевірить вміст конверта і правильність заповнення бланка замовлення.

Зберігання та транспортування: до і після взяття крові набір зберігати при кімнатній температурі в сухому місці; уникати контакту з системами опалення; уникати попадання прямих сонячних променів; при транспортуванні упакувати набір (набори) в поліетиленовий герметично закривається пакет.

Показання до призначення

• Подібні випадки захворювання в сім'ї.
• Випадки раптової смерті дитини в ранньому віці в родині.
• Різке погіршення стану дитини після короткочасного періоду нормального розвитку (безсимптомний проміжок може складати від декількох годин до декількох тижнів).
• Незвичайний запах тіла і / або сечі ( «солодкий», «мишачий», «вареної капусти», «спітнілих ніг» і ін.).
• неврологічні порушення- порушення свідомості (летаргія, кома), різні типи судомних нападів, зміна м'язового тонусу (м'язова гіпотонія або спастичний тетрапарез).
• Порушення ритму дихання (брадіпное, тахіпное, апное).
• Порушення з боку інших органів і систем (ураження печінки, гепатоспленомегалія, кардіоміопатія, ретинопатія).
• Зміни лабораторних показників крові та сечі - нейтропенія, анемія, метаболічний ацидоз / алкалоз, гіпоглікемія / гіперглікемія, підвищення активності печінкових ферментів і рівня креатинфосфокінази, кетонурія.
• Додаткова діагностика 37 спадкових хвороб обміну речовин поряд з обов'язковою державною програмоювиявлення 5-ти спадкових захворювань: скринінг новонароджених: «п'ятки».

інтерпретація результатів

Інтерпретація результатів досліджень містить інформацію для лікуючого лікаря і не є діагнозом. Інформацію з цього розділу можна використовувати для самодіагностики і самолікування. Точний діагноз ставить лікар, використовуючи як результати цього обстеження, так і потрібну інформацію з інших джерел: анамнезу, результатів інших обстежень і т.д.

Одиниці виміру в лабораторії ИНВИТРО: мкмоль / літр. Референсні значення для визначених параметрів (деталізована інтерпретація результатів)

Загальна інтерпретація результату

Спадкові захворювання обміну речовин	Зміна концентрації метаболітів
Хвороба «з запахом кленового сиропу сечі» (лейциноз)	лейцин Валін
Цітрулінемія тип 1, неонатальна цітрулінемія	цітрулін
Аргініносукціновая ацидурия (АСА) / недостатність аргініносукцінат ліази ліази	цітрулін
Недостатність орнітин транскарбамілази	цітрулін
Недостатність карбамілфосфат синтази	цітрулін
Недостатність N-ацетілглютамат синтази	цітрулін
Некетотіческая гіпергліцінемію	гліцин
Тирозинемия тип 1	тирозин
Тирозинемия тип 2	тирозин
Гомоцистинурія / недостатність цистатіонін бета-синтетази	метіонін
фенілкетонурія	фенілаланін
Аргінінемія / недостатність аргінази	аргінін
Пропіонова ацидемія (недостатність пропіоніл КоА карбоксилази)	С3
Метилмалонова ацидемія	С3 (С4DC)
Изовалериановая ацидемія (недостатність ізовалеріл КоА дегідрогенази)	С5
Недостатність 2-метілбутіріл КоА дегідрогенази	С5
Недостатність ізобутіріл КоА дегідрогенази	С4
Глутарова ацидемія тип 1 (недостатність глутарил КоА дегідрогенази тип 1)	С5DC
Недостатність 3-метілкротоніл КоА карбоксилази	С5ОН
Множинна карбоксілазная недостатність	С5ОН С3
недостатність біотинідази	С5ОН
Малонова ацидемія (недостатність Малоні КоА декарбоксилази)	С3DC
Недостатність мітохондріальної ацетоацетил КоА тіолази	С5: 1 С5ОН
Недостатність 2-метил-3-гідроксібутіріл КоА дегідрогенази	С5: 1 С5ОН
Недостатність 3-гідрокси-3-метилглутарил КоА ліази	С5ОН С6DC
Недостатність 3-метілглутаконіл КоА гідратази	С6DC
Недостатність середньоланцюговими ацил-КоА дегідрогенази	С6 С8 С10 С10: 1
Недостатність дуже довголанцюгової ацил-КоА дегідрогенази	С14 С14: 1 С14: 2 С16: 1
Недостатність коротко ацил-КоА дегідрогенази	С4
Недостатність довголанцюгової 3-гідроксіаціл-КоА дегідрогенази (дефект тріфункціонального білка)	С16OH С18ОН С18: 1OH С18: 2OH
Глутарова ацидемія тип II (недостатність глутарил КоА дегідрогенази тип II), множинна недостатність ацил-КоА дегідрогеназ	С4 С5 С6 С8 С10 С12 С14 С16 С18
Порушення транспорту карнітину	C0 ↓ тотальне зниження ацилкарнітину
Недостатність карнітин палмітоіл трансферази тип I	С0 С16 ↓ С18: 1 ↓ С18: 2 ↓
Недостатність карнітин палмітоіл трансферази тип II	C0 ↓ С16 С18: 1 С18: 2
Недостатність карнітин / ацилкарнітину транслокази	C0 ↓ С16 С18: 1 С18: 2
Недостатність 2,4-діеноіл КоА редуктази	С10: 2
Недостатність середньоланцюговими 3-кетоацил-КоА тіолази	С6DC С8DC
недостатність середньо- / коротко ацил-КоА дегідрогенази	С4ОН С6ОН

Що робити, якщо в результаті дослідження виявлено зміну показників? Необхідно розуміти, що зміни, виявлені при ТМС, повністю не підтверджують захворювання, а в ряді випадків, необхідно пройти додаткові тести, (див. Список додаткових тестів і) щоб переконатися в достовірності виявлених порушень. Рекомендується консультація лікаря-генетика і педіатра, щоб виробити тактику спільних дій. Використана література (референсні значення)

1. Wiley V., Carpenter K., Wilcken B. Newborn screening with tandem mass spectrometry: 12 months 'experience in NSW Australia. Acta Paediatrica 1999; 88 (Suppl): 48-51.
2. Rashed MS, Rahbeeni Z, Ozand PT. Application of electrospray tandem mass spectrometry to neonatal screening. Semin Perinatol 1999; 23: 183-93.
3. Schulze A., Lindner M., Kohlmüller D., Olgemöller K., Mayatepek E., Hoffmann G.F. Expanded Newborn Screening for Inborn Errors of Metabolism by Electrospray Ionization-Tandem Mass Spectrometry: Results, Outcome, and Implications, Pediatrics, 2003; 111; 1399-1406.
4. Hoffman G., Litsheim T., Laessig R. Implementation of tandem mass spectrometry in Wisconsin's newborn screening program. MMWR Morb MortalWkly Rep 2001; 50 (RR-3): 26-7.
5. Lin W.D., Wu J.Y., Lai C.C., Tsai F.J., Tsai C.H., Lin S.P., Niu D.M. A pilot study of neonatal screening by electrospray ionization tandem mass spectrometry in Taiwan. Acta Paediatr Taiwan 2001; 42: 224-30.
6. Zytkovicz T.H., Fitzgerald E.F., Marsden D., Larson C.A., Shih V.E., Johnson D.M., et al. Tandem mass spectrometric analysis for amino, organic, and fatty acid disorders in newborn dried blood spots: a two year summary from the New England Newborn Screening Program. Clin Chem 2001; 47: 1945-55.

Що таке Тандемна Мас-спектрометрія

Тандемна мас-спектрометрії (ТМС) - один із сучасних методів аналізу сполук, який широко використовується для різних як наукових, так і практичних цілей. Цей метод дозволяє проводити аналіз декількох сотень сполук в микроколичествах біологічного матеріалу.

Де застосовується цей метод?

У світовій практиці охорони здоров'я цей метод застосовують для проведення масового скринінгу новонароджених на спадкові хвороби обміну речовин (НБО). У плямі висушеної крові можливе визначення амінокислот (в тому числі і фенілаланіну) і ацилкарнітину. Кількісне визначення цих речовин дозволяє виключати кілька десятків спадкових захворювань, що відносяться до різних класів НБО (порушення метаболізму амінокислот, органічних кислот і дефектів мітохондріального β-окислення жирних кислот). За зарубіжними літературними даними їх сумарна частка складає 1: 2000 живих новонароджених. Раніше для діагностики цих порушень потреба у великій кількості біологічного матеріалу, проведення декількох досліджень (амінокислотний аналіз, хроматомасс-спектрометрія, визначення спектру ацилкарнітину), що вимагало значного часу і матеріальних витрат. ТМС дозволяє кількісно визначити всі ці сполуки протягом одного аналізу!

Які захворювання можна виявити за допомогою цього методу?

На жаль одного універсального високочутливого і специфічного тесту для діагностики всіх відомих НБО поки не існує, але технології, спрямовані на виявлення кілька десятків і навіть сотень хвороб в одному аналізі вже стають реальністю. До таких методів відноситься і ТМС. Цей метод дозволяє з високою достовірністю виявляти близько 40 спадкових порушень метаболізму амінокислот, органічних кислот і дефектів мітохондріального бета-окислення жирних кислот. Більшість з цих захворювань проявляються в період новонародженості. Перелік захворювань, які можна діагностувати з застосуванням цієї технології наведено в розділі аналізи

Чому необхідно якомога раніше діагностувати хвороби обміну речовин?

Багато лікарів помилково вважають, що РНБО зустрічаються так рідко, що виключати їх потрібно тільки в останню чергу, і дуже часто правильний діагноз встановлюється вже на пізніх термінах або захворювання взагалі не діагностується.

Однак, вже відомо понад 150 форм НБО для яких розроблені методи ефективної терапії і від того як швидко і правильно поставлений діагноз багато в чому залежить життя і здоров'я пацієнта. Для 20 захворювань, які можна діагностувати з застосуванням ТМС, розроблено спеціальне лікування. Поставлений вчасно діагноз врятоване життя і здоров'я пацієнта!

Правила збору зразків крові

Кров збирається на стандартну картку-фільтр (№903), який застосовують для скринінгу новонароджених на ФКУ. Кров може бути як капілярна (з пальця, п'яти), так і венозна. Необхідно добре просочити виділену область на фільтрі! На картці-фільтрі обов'язково повинно бути чітко вказані ПІБ, ким і звідки направлений пацієнт, дата народження і телефон лікаря. Зразок висушується 2-3 години на повітрі. Бажано додати виписку з історії хвороби.

Протягом багатьох років скринінг в основному виконували тестами, Специфічними для кожного окремого захворювання. Наприклад, скринінг ФКУ був заснований на мікробіологічної або хімічної оцінці підвищення фенілаланіну.

Ця ситуація повністю змінилася за останній десятиліттяз появою технології тандемной мас-спектрометрії (ТМС). Аналіз тандемной мас-спектрометрією (ТМС) може не тільки точно і швидко виявити підвищений фенілаланін в плямі крові у новонародженого з меншим числом хибнопозитивних відповідей в порівнянні зі старими методами, але також одночасно дозволяє виявити кілька десятків інших біохімічних порушень.

Деякі з них вже скрініровалі індивідуальними тестами. Наприклад, багато держав використовували специфічні тести для виявлення підвищення метіоніну, щоб виявляти Тандемний мас-спектрометрії (ТМС) виявилася також надійним методом НЕ-онатального скринінгу деяких захворювань, які відповідають критеріям скринінгу, але не мали раніше надійного тесту.

наприклад, недостатність MCAD- захворювання окислення жирних кислот, зазвичай безсимптомний, але виявляється клінічно, коли у пацієнта підвищується катаболізм. Виявлення недостатності MCAD при народженні може виявитися життєво важливим, оскільки хворі діти мають дуже високий ризикжізнеугрожающих гіпоглікемії в ранньому дитинстві при катаболічних станах, викликаних інтер-куррентнимі захворюваннями, наприклад вірусною інфекцією.

Майже чверть дітей з недіагностованою недостатністю MCADвмирають при першому ж епізоді. При правильному лікуванні метаболічну розлад може бути купировано. При недостатності MCAD первинна мета скринінгу - попередження батьків і лікарів про ризик метаболічної декомпенсації, так як діти між нападами практично здорові і не потребують щоденного лікуванні, крім виключення тривалого голодування.

Проте використання тандемной мас-спектрометрії(ТМС) для неонатального скринінгу залишається під питанням. Крім забезпечення швидкого тестування багатьох порушень, неонатальний скринінг при яких вже робиться або може бути виправданий, тандемна мас-спектрометрії (ТМС) також виявляє новонароджених з вродженими помилками метаболізму типу метилмалоновой ацидемії, зазвичай не входять в програми скринінгу через їх рідкості і труднощі забезпечення остаточної терапією, що оберігає від прогресуючого неврологічного погіршення.

Захворювання, які виявляються при тандемной мас-спектрометрії

I. Аміноацідеміі:
- ФКУ
- Хвороба сечі із запахом кленового сиропу
- Гомоцістінурія
- Цітруллінемія
- Аргініноянтарная ацидурия
- Тирозинемия I типу

II. органічні ацидемії:
- Пропіонова ацидемія
- Метилмалонова ацидемія
- Изовалериановая ацидемія
- Ізольована 3-метил-Кротона-гліцінемія
- Глутаровий ацидемія (тип I)
- Недостатність мітохондріальної ацетоацетил-коа-тіолази
- Гідроксіметілглутаровая ацидемія
- Недостатність безлічі коа-карбоксилаз

III. Порушення окислення жирних кислот:
- Недостатність SCAD
- Недостатність гідрокси-SCAD
- Недостатність MCAD
- Недостатність VLCAD
- Недостатність LCAD і недостатність тріфункціонального білка
- Глутаровий ацидемія II типу
- Недостатність карнітин-пальмітоілтрансферази II

Тандемна мас-спектрометрії (ТМС)також може ідентифікувати аномальні метаболіти з невизначеним значенням для здоров'я. Наприклад, недостатність SCAD - інше захворювання окислення жирних кислот, найчастіше безсимптомний, хоча деякі пацієнти можуть мати труднощі, пов'язані з епізодичній гіпоглікемією. Таким чином, прогностична цінність позитивного результату аналізу тандемной мас-спектрометрії (ТМС) для симптоматичної SCAD, ймовірно, буде дуже низькою.

Переважує чи перевага виявлення недостатності SCADнегативний вплив тесту, що викликає невиправдане занепокоєння батьків, для більшості новонароджених з позитивним результатомтесту, так ніколи і не виявили клінічних симптомів? Таким чином, не кожне захворювання, що виявляється методом тандемной мас-спектрометрії (ТМС), відповідає критеріям для неонатального скринінгу.

Саме тому деякі експертив системі охорони здоров'я доводять, що батькам і лікарям потрібно повідомляти тільки про відхилення в метаболітах з доведеною клінічною користю. Інші відстоюють використання всієї інформації, що надається тандемной мас-спектрометрією (ТМС), і пропонують повідомляти батькам і лікарям про всі аномальних метаболітах, незалежно від того, наскільки добре захворювання відповідає стандартним критеріям неонатального скринінгу. Надалі можна ретельно спостерігати за пацієнтами з аномаліями невідомого значення. З усіх цих причин використання тандемной мас-спектрометрії (ТМС) для скринінгу новонароджених і залишається предметом дискусії.

для популяційного скринінгув допологовому періоді зазвичай використовують два тести: хромосомний аналіз у жінок старшого віку і АФП сироватки крові матері або потрійний тест на ДНТ і хромосомні анеуплоїдії.

якщо вагітністьнаражається на ризик через ін-вазівной процедури пренатальної діагностикихромосомної анеуплоїдії внаслідок віку матері, також слід запропонувати додаткове обстеження, наприклад визначення рівня АФП в амніотичної рідини, повногеномне порівняльну гібридизацію для пошуку небезпечних субмикроскопических делеций, скринінг мутацій муковісцидозу та інших частих захворювань.

Протягом вагітності жінці доводиться здавати безліч лабораторних аналізів, і після оцінки результатів одного з них вона може дізнатися про те, що у неї густа кров. Чи небезпечно це стан крові для майбутньої матері і її малюка? Чому це сталось? Що робити? Чи можна обійтися без прийому медикаментів? Всі ці та багато інших питань неодмінно виникають у кожної жінки, яка зіткнулася з такою проблемою, і в нашій статті ми відповімо на кожен з них.

При виявленні густий крові майбутньої матері ні в якому разі не варто впадати в паніку. Найчастіше такий стан крові під час виношування дитини не представляє небезпеки і легко коригується, але іноді жінці буде потрібно пройти курс лікування, який буде направлений на запобігання певних ризиків.

Які аналізи крові можуть вказувати на згущення крові?

При підозрі на підвищення в'язкості крові лікар призначить аналіз крові на згортання.

Причинами густий крові можуть стати самі різні чинники і захворювання. У деяких випадках жінка може навіть не підозрювати про них.

У більшості випадків вагітна дізнається про те, що у неї густа кров, на черговому прийомі у лікаря після того, як вона здала загальний аналіз. Доктор обов'язково помітить підвищення рівня формених елементів крові і гематокриту і повідомить про це жінці. Іноді про густий крові вагітна може дізнатися від лаборанта, який забирає кров з вени і зауважує, що вона погано всмоктується в шприц, закупорюючи просвіт голки. Про таке явище слід обов'язково повідомити лікаря.

При виявленні вищеописаних ознак густоти крові лікар обов'язково направить вагітну на такий аналіз, як коагулограмма. Саме цей метод дослідження допоможе більш детально вивчити стан системи згортання крові і зумовить подальшу тактику діагностики та терапії.

Показники коагулограми визначають такі параметри крові:

• фібриноген - норма 2-4 г / л, зі збільшенням терміну вагітності показник зростає до 6 г / л;
• тромбіновий час - норма 11-18 с;
• АЧТЧ - норма 24-35 с, при зростанні фібриногену в зв'язку зі збільшенням терміну вагітності цей показник прискорюється до 17-20 с;
• протромбин - норма 78-142%;
• вовчаковий антикоагулянт - в нормі відсутній.

При підвищеній густоті крові показники коагулограми змінюються таким чином:

• фібриноген - підвищується;
• тромбіновий час - прискорюється;
• АЧТЧ - прискорюється;
• протромбин - підвищується;
• вовчаковий антикоагулянт - присутній.

Пам'ятайте про те, що розшифрувати результати коагулограми і оцінити ступінь густоти крові може тільки фахівець! Саме він зможе вирішити питання про доцільність призначення медикаментозного лікування.

Чи небезпечна густа кров при вагітності для жінки і плоду?

Виявивши зміна густоти крові у вагітної, доктор оцінює ступінь цих порушень і визначає тактику ведення пацієнтки.

Саме за результатами коагулограми фахівець зможе визначити ступінь небезпеки згущення крові при вагітності. У деяких випадках, при незначних змінах показників, лікар не надає серйозного значення густоті крові і дає жінці загальні рекомендаціїщодо дієти і споживання рідини, спрямовані на усунення цього симптому. В таких ситуаціях не слід хвилюватися, т. К. Таке згущення крові не несе загрози ні майбутньої матері, ні плоду, а після пологів показники коагулограми стабілізуються самостійно.

Іноді причиною згущення крові під час вагітності стає прийом залізовмісних препаратів, які призначаються при зниженні рівня гемоглобіну. Такий симптом теж не повинен викликати хвилювання у жінки, т. К. Після усунення анемії та скасування цих лікарських засобів стан крові стабілізується.

При більш серйозні зміни в показниках коагулограми лікар може рекомендувати вагітній пройти курс терапії для розрідження крові. У таких ситуаціях жінці також не слід хвилюватися, а просто виконувати всі призначення лікаря. Небезпека такого згущення крові криється в підвищенні ризику утворення тромбів і утрудненому струмі крові по судинах, але цю ситуацію можна виправити.

Уповільнений ток в'язкої крові по судинах і більш інтенсивне навантаження на серце викликає недостатнє надходження кисню і поживних речовин в усі тканини і органи. Це призводить до появи таких симптомів у вагітної:

• постійна млявість;
• погіршення пам'яті;
• сонливість;
• сухість в роті;
• тяжкість в ногах;
• похолодання кінцівок.

При малорухливому способі життя і відсутності лікування підвищена схильність до тромбоутворення може призводити до розвитку таких ускладнень у майбутньої матері:

• тромбози;
• тромбофлебіт;
• ТЕЛА;
• варикозна хвороба;
• захворювання серцево-судинної системи(Інфаркт, гіпертонічна хвороба, Інсульт, атеросклероз).

Значно підвищена густота крові негативно позначається і на стані майбутнього малюка. В результаті підвищеного тромбобразованія і уповільненої течії крові з боку плода можуть спостерігатися такі порушення:

• викидень або передчасні пологи;
• завмерша вагітність;
• гіпоксія;
• затримка в розвитку.

Саме в зв'язку з перерахованими вище можливими ускладненнямигустий крові жінкам, які планують вагітність, слід відмовитися від зачаття до завершення курсу терапії такого стану. У ряді випадків це порушення в системі згортання крові може бути небезпечним для життя майбутньої матері і малюка, а під час виношування дитини жінці можна приймати не всі лікувальні препарати. Тому позбавлятися від цього симптому краще до настання вагітності.

При плануванні зачаття лікар обов'язково призначить проведення коагулограми для виключення порушень в системі згортання крові. Особливо актуально проведення такого дослідження в певних групах ризику:

• в анамнезі жінки були випадки викиднів або завмерлих вагітностей;
• у жінки або її родичів спостерігається варикозне розширеннявен;
• у близьких родичів жінки були тромбози, інфаркти або інсульти;
• жінка професійно займається спортом, який пов'язаний з інтенсивними фізичними навантаженнями.

Що робити при густий крові під час вагітності?

При виявленні перших симптомів густий крові жінці необхідно розповісти про них лікаря. Якщо ж ознаки згущення крові були виявлені під час аналізів, то доктор обов'язково призначить вагітної ряд додаткових досліджень для визначення ступеня вираженості такого порушення згортання і з'ясування причин його виникнення. Спровокувати згущення крові можуть самі різні захворювання і патології: антифосфоліпідний синдром, захворювання печінки, патології крові, гломерулонефрит, ревматизм, системний червоний вовчак та ін. Саме тому тактика подальшого обстеження буде залежати від кожного конкретного випадку.

При відсутності значних порушень в коагулограмме і захворювань лікар може рекомендувати жінці деякі зміни в способі життя і харчування. До них відносять:

• достатню добове споживання рідини невеликими порціями (близько 1,5 л, але денна норма може змінюватися при присутності набряків і інших захворювань);
• достатня рухова активність, яка сприяє кращій циркуляції крові;
• регулярні прогулянки на свіжому повітрі, які попереджають кисневе голодування;
• введення в щоденний раціон продуктів, які сприяють розрідженню крові, і обмеження тих продуктів, які викликають її згущення;
• обмеження солі.

Таким пацієнткам лікар обов'язково призначить повторні аналізи коагулограми, один з яких буде проводитися через індивідуально певний проміжок часу (для контролю ефективності профілактичних заходів), а другий - за кілька тижнів перед пологами.

При більш вираженому згущення крові вагітної може не вистачити дотримуватися вищеописаних рекомендацій. У таких випадках, крім курсу лікування основного захворювання, що викликав густоту крові, лікар призначить жінці медикаментозну терапію.

Для розрідження крові можуть призначатися такі препарати:

Тривалість лікування, підбір дози та препарату може виконуватися тільки лікарем, який враховує загальний стан жінки і керується показниками коагулограми (первинної і повторних). На 36 тижні вагітності або за 14 днів до передбачуваного розродження всі лікарські засоби скасовуються, т. К. Вони можуть стати причиною різних ускладнень під час пологів.

Незважаючи на той факт, що густа кров виявляється у багатьох вагітних, всім жінкам рекомендується не тільки зберігати спокій, а й неухильно дотримуватися рекомендацій лікаря. Таке порушення згортання крові не завжди вказує на наявність значного ризику для майбутньої матері і плоду, але в певних випадках може призводити до розвитку важких наслідків. Виконуючи всі призначення лікаря, жінка зможе запобігти грізні ускладнення і збереже здоров'я і життя собі і своєму майбутньому малюкові. Пам'ятайте про це! Не займайтеся самолікуванням і будьте здорові!

Чому болить серце при вагітності? Вагітність вносить безліч змін в роботу органів жінки, і серце не є винятком. У більшості випадків виникають в ньому болю не оп ...

Чому низький тиск при вагітності? Низький тиск при вагітності (або гіпотонія вагітних) спостерігається у багатьох жінок в першому триместрі і є варіантом фізіологічної норми ....

Вагітність і стеноз мітрального клапана Під час вагітності серце транспортує більшу кількість крові, т. К. При такому стані у жінки об'єм циркулюючої крові збільшується на 3 ...

Високий тиск при вагітності Протягом вагітності підвищення артеріального тискузустрічається у кожної десятої жінки. У кожної двадцятої пацієнтки гіпертензія стає прич ...

Діагностика вегето-судинної дистонії

• 1 Коли треба до лікаря?
• 2 Методи діагностики ВСД
  • 2.1 Перший прийом
  • 2.2 Збір анамнезу та огляд хворого
  • 2.3 Лабораторні аналізи
  • 2.4 Діагностичні процедури
    • 2.4.1 Проведення ЕКГ
    • 2.4.2 Ехокардіографія (ЕхоКГ)
    • 2.4.3 Реоенцефалографія (РЕГ) судин голови
    • 2.4.4 Вимірювання серцевого ритму
    • 2.4.5 Магнітно-резонансний томограф (МРТ)
    • 2.4.6 Інші методи обстеження
  • 2.5 Диференціальний аналіз
• 3 Лікування ВСД

Точна діагностика ВСД базується на комплексному дослідженні організму. Діагностувати вегетативну дистонію - значить виключити наявність захворювань, що мають схожі симптоми. Лабораторні дослідження крові, допомога додаткових діагностичних приладів (УЗД, ЕКГ, МРТ), ретельний аналіз, наявних хронічних захворювань у дітей, й допоможуть лікарю в діагностиці.

Коли треба до лікаря?

Вегетосудинна дистонія відображає проблеми в роботі центральної нервової системи. Вегетативна система в таких умовах не допомагає адаптуватися організму до мінливих чинників, а, навпаки, вона змушує організм функціонувати в гарячковому режимі. Трапляються напади панічної атаки, серце стукає з перебоями, виникає запаморочення, з'являються серцеві болі, спазми судин головного мозку, виникають головні болі, відбуваються скачки тиску в більшу або меншу сторону, порушується циркуляція крові в органах. Та все це більш ніж вагомий привід звернутися до лікаря. Якщо результати діагностики кожного органу не підтвердять його захворювання - це причина діагностувати ВСД.

Повернутися до списку

Методи діагностики ВСД

Діагностику ВСД, що дозволяє дізнатися про наявність патології, проводять за допомогою приладів, що дозволяють досліджувати електрофізіологічних роботу серцевого м'яза (на ЕКГ), виявити функціональні зміни серця та його клапанного апарату (ЕхоКГ), оцінити анатомічні та функціональні особливості кровотоку (МРТ), отримати об'єктивну оцінку тонусу, еластичності стінок судин мозку, величину пульсового кровонаповнення (РЕГ). Лабораторні дослідження крові включають в себе:

• загальний і біохімічний аналіз крові (показники ШОЕ, лейкоцити, гемоглобін);
• вміст цукру в крові;
• рівень тиреотропного гормонів щитовидної залози,

Повернутися до списку

перший прийом

Якщо вчасно звернутися до лікаря, можна уникнути негативних наслідків.

Перед першим прийомом у лікаря необхідно напередодні виключити прийом алкоголю, кави, утриматися від дієти. Необхідний повноцінний відпочинок. Під час першого прийому доктор на основі об'єктивних скарг пацієнта призначає подальші дослідження, які підтвердять або спростують діагноз ВСД. Звертають увагу на тип складання, так як астенічний (крихке) статура або, навпаки, зайве ожиріння, можливі при ВСД. Чи присутні симптоми нервового перенапруження, стресу. Чим більш докладними і чесними будуть відповіді пацієнта, тим з більшою ймовірністю вдасться поставити правильний діагноз.

Повернутися до списку

Збір анамнезу та огляд хворого

Під час огляду пацієнта відзначають тип складання, стан шкірних покривів, Вимірюють температуру тіла, відзначають наскільки холодні кінцівки. Чи має місце «мармурова» шкіра, ділянки з порушенням кровопостачання. Так як до причин розвитку вегетосудинної дистонії відносять вплив зовнішніх чинників, доктор під час первинного огляду, фіксує:

• наявність стресових ситуацій, було емоційне напруження;
• наскільки правильний спосіб життя веде пацієнт (куріння, зловживання алкоголем);
• які фізичні навантаження отримує;
• які травми голови були в минулому;
• наскільки повноцінним є період відпочинку, чи достатній він;
• які спадкові захворювання є в анамнезі.

Повернутися до списку

лабораторні аналізи

Для повної картини хвороби лікар призначить комплекс аналізів.

Як правило, починають з загальних аналізівкрові і сечі, які здатні підтвердити або спростувати наявність певного захворювання. Підвищений показник ШОЕ, лейкоцитів говорять про розвиток в організмі патологій, інфекційних, вірусних захворюваннях. Зміст в крові високого рівня тиреотропного гормонів - ознака захворювань щитовидної залози - тиреотоксикозу. біохімічний аналізкрові на вміст калію дозволяє підтвердити або спростувати захворювання надниркових залоз - гиперальдостеронизм. Інша серйозне захворювання - феохромоцитома - визначається рівнем адренокортикотропного гормонів.

Повернутися до списку

діагностичні процедури

При вегето-судинної дистонії характер симптомів аналогічний іншим захворюванням. Для постановки діагнозу необхідна консультація не тільки терапевта, а й кардіолога, невропатолога, гастроентеролога, окуліста, гінеколога. Кожен лікар дає направлення на обстеження роботи певного органу за допомогою діагностичних апаратів.

Повернутися до списку

проведення ЕКГ

До недорогому, але цінному методу обстеження відносять електрокардіографію. Електрокардіограма дозволяє оцінити фізичний стан серця, показує гостре або хронічне ушкодження міокарда, визначає частоту і регулярність серцевих скорочень. Розшифровувати ЕКГ повинен лікар-кардіолог.

Повернутися до списку

Ехокардіографія (ЕхоКГ)

Ехокардіографія один з методів діагностики.

Ехокардіографія як метод ультразвукового дослідження дозволяє вивести на екран зображення серцевого м'яза. Це дає можливість встановити стан м'яких тканин і товщину стінок серця, дослідити особливість руху крові в передсердях і шлуночках серця. Показанням є:

• підозри ІХС;
• гіпертонія;
• ознаки серцевої недостатності.

Повернутися до списку

Реоенцефалографія (РЕГ) судин голови

Перевага такого методу дослідження - можливість отримання відомостей про стан артеріальної та венозної систем мозку. Реоенцефалографія допомагає діагностувати атеросклероз судин мозку, ознаки порушень прохідності магістральних судин, порушення мозкового кровообігу. Ця процедура абсолютно безболісна, але ефективна.

Повернутися до списку

Вимірювання серцевого ритму

Збудливість ВНС призводить до порушень серцевого ритму. Частота пульсу виходить за межі 100 ударів в хвилину, викликаючи тахікардію, або стає менше 60 ударів / хвилина, що говорить про брадикардії. Серцево-судинні розлади викликають дихальну аритмію - на вдиху частота пульсу збільшується, на видиху - зменшується. Вимірювати пульс необхідно на кожній руці протягом 1 хвилини, звертаючи увагу на ритм ударів, їх силу.

Повернутися до списку

Магнітно-резонансний томограф (МРТ)

МРТ дозволяє за допомогою методики магнітно-резонансної ангіографії отримати зображення просвіту судин. Це дає уявлення про анатомічні, функціональні особливості кровотоку. Метод МР-перфузії дає уявлення про проникності стінок судин, активності венозного потоку, що дозволяє визначити здорові і патологічні змінені тканини мозку.

Повернутися до списку

Інші методи обстеження

Ультразвукова діагностика дозволяє перевірити всі внутрішні органи.

Ультразвукове обстеження органів шлунково-кишкового тракту, серця, сечостатевої системидозволяє діагностувати захворювання шлунка, серця, підшлункової залози, нирок. Для оцінки діяльності вегетативної системи використовують такі методичні прийоми, як визначення індексу Кердо. Для цього потрібні дані - частота пульсу в хвилину і показник діастолічного артеріального тиску. Значне перевищення нижнього АТ над частотою пульсу свідчить про переважання симпатичної системив роботі ВНС. Зворотна картина говорить про переважання парасимпатичного відділу. У нормі показники нижнього артеріального тиску і частота пульсу не повинні сильно відрізнятися один від одного.